A partir de cultivos en medio líquido se carga el asa bacteriológica con una gota de de cultivo y se deposita en un portaobjetos limpio realizando una extensión de la muestra hasta conseguir una capa fina (frotis). Si partimos de un cultivo en medio sólido, primeramente dispondremos una pequeña gota de agua en el portaobjetos. A continuación se carga el asa con una pequeña cantidad de bacterias de una colonia del cultivo y se resuspende en la gota de agua, tras lo cual realizaremos el frotis.

Posteriormente debemos secar la preparación acercándola a la llama del mechero evitando que se caliente demasiado (comprobar con el dorso de la mano que no quema). Una vez seca, se procede a la fijación, haciendo pasar la preparación 3-4 veces por la llama del mechero (la llama debe tocar la parte inferior del portaobjetos). A partir de este momento la preparación está lista para teñir y el procedimiento a seguir depende del tipo de tinción.

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