Extracción de ADN
Extracción mediante el kit comercial INSTAGENE
Cada mesa dispone de una bacteria problema. Se selecciona una colonia del microorganismo desarrollado en un medio sólido y se resuspende en 1 mL de suero fisiológico estéril. Se agita fuertemente hasta conseguir una suspensión homogénea y se centrifugan a 3000‐5000 rpm durante 1-2 minutos. Se retira el suero sobrenadante y nos quedamos con el precipitado de células. Cerrar y rotular adecuadamente el tubo.
Extracción de ADN :
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- Al precipitado que tenemos le añadimos 200 μL de solución de lisis (Instagene).
- Agitar y poner a 56ºC durante 15 min.
- Pasado este tiempo agitar en el vórtex 10‐15 segundos por tubo
- Incubar a 100ºC durante 8 minutos.
- Agitar de nuevo en vórtex 10‐15 segundos por tubo
- Centrifugar 1 minuto a máxima velocidad.
- Usar el sobrenadante (es donde se encuentra el DNA) para la realización de la PCR o almacenar a ‐20ºC para usar más adelante.
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